대사공학적 기술을 통한 Benzene 으로부터 L-DOPA 생산 = The production of L-DOPA from benzene using metabolic engineering technology

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L-Dopa는 parkinson``s diease의 치료제로 70년대초부터 생물공정으로 대채하려는 연구가 진행되어 90년대에 이르러 tyrosine phenol lyase에 의한 catechol, NH4+와 pyruvate로부터 L-DOPA를 생산하는 공정이 산업화되었다. 이 고부가의 약품을 생산하는 새로운 경로를 대사공학 기술를 통해서 만들었는데, catechol보다 훨씬 값싸고 대표적인 석유화학공업 폐기물 중의 하나인 benzene 으로부터 catechol을 생성하는 경로와 catechol로부터 L-DOPA를 생성하는 경로를 접목하였다. 이 경로를 E. coli에 적용한 결과 benzene의 toxicity때문에 cell이 깨지므로 3시간이상 operation이 불가능하였다. 이 점을 극복하기 위해서 host를 Pseudomonas로 바꾸고 benzene을 3mM/30min으로 낮게 feeding함으로서 최종적으로 9시간 동안 15mM의 L-DOPA를 생산하였다. 이 system에서의 율속단계는 catechol에서 L-DOPA를 생성하는 단계로 tyrosine phenol lyase의 활성이 낮아 catechol이 어느정도 축적되고, 이 축적물이 산화하면서 benzene을 attack하는 toluene dioxygenase를 불활성화시키는 것으로 나타났다. 이를 해결하기 위해서 공정상에서 고정화, airlift reactor에 적용, 온도 등의 여러 가지 시도를 하였으나 catechol의 축적과 산화를 막을 수는 없었다. 결국 tyrosine phenol lyase의 발현양이 E. coli에 비해서 Pseudomonas에서 훨씬 낮은 것으로 드러나 이 효소의 발현을 증가시킴으로서 해결된 것으로 생각된다.
Advisors
김학성researcherKim, Hak-Sungresearcher
Description
한국과학기술원 : 생물과학과,
Publisher
한국과학기술원
Issue Date
1996
Identifier
105854/325007 / 000943239
Language
kor
Description

학위논문(석사) - 한국과학기술원 : 생물과학과, 1996.2, [ 49 p. ]

Keywords

DOPA; Metabolic engineering; Benzene

URI
http://hdl.handle.net/10203/28484
Link
http://library.kaist.ac.kr/search/detail/view.do?bibCtrlNo=105854&flag=dissertation
Appears in Collection
BS-Theses_Master(석사논문)
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