당전이 효소가 도입된 CHO 세포에서 생산된 재조합 EPO의 당쇄구조 분석 = Glycan analysis of recombinant erythropoietin produced by glycosyltransferase-engineered Chinese hamster ovary cells

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1. CHO 세포에 당전이 효소인 β1,4-Galactosyltransferase(GT)와 α 2,3-sialyltransferase(ST)를 도입하였다. 2. CHO 세포배양을 통해 얻어진 배양액에서 Immunoaffinity column을 이용하여 EPO를 순수분리정제 하였다. 3. GT와 ST를 도입하여 얻어진 EPO(GTST15)의 경우 control(EC1)에 비해 tri-ialylated glycan 양이 EC1에서의 17.3%에서 35.5%까지 향상이 되었고 GTST15에서의 mono-sialylated glycan의 양은 EC1에서의 31.2%에서 18.1%까지 줄어든 것을 볼 수 있었다. 4. 2-D HPLC를 이용한 당쇄구조 분석에서 EC1에서 상대적인 양을 가장 많이 차지하는 Gal가 3개, lactosamine unit3개, Fuc를 갖는 tetra-antennay 구조는 GTST15에서 상대적인 양이 많이 줄어든 것을 볼 수 있었다. 반면 Gal 4개, lactosamine unit5개, Fuc를 갖는 tetra-antennary 구조는 GTST에서 현저하게 증가된 것을 볼 수 있었다.
Advisors
김정회researcherKim, Jung-Hoeresearcher
Description
한국과학기술원 : 생명과학과,
Publisher
한국과학기술원
Issue Date
2005
Identifier
243527/325007  / 020033545
Language
kor
Description

학위논문(석사) - 한국과학기술원 : 생명과학과, 2005.2, [ vii, 60 p. ]

Keywords

DEAE 크로마토그래피; 시알산 전이효; 갈락토오스 전이효소; 에리쓰로포에틴; 차이니즈 햄스터 오버리 세포; CHO; 2-D HPLCnjugation; DEAE Chromatography; sialyltransferase; galactosyltransferase; galactosylation; sialylation; erythropoietin

URI
http://hdl.handle.net/10203/28053
Link
http://library.kaist.ac.kr/search/detail/view.do?bibCtrlNo=243527&flag=dissertation
Appears in Collection
BS-Theses_Master(석사논문)
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