자일로스 환원효소의 항구적 발현을 이용한 고생산성 자일리톨 생산방법

Abstract

본 발명은 자일로스 환원효소(xylose reductase)가 항구적으로 발현(constitutive expression)되는 자일리톨 생산균주를 이용하여 포도당을 탄소원으로 하는 배지에서 자일리톨을 고수율로 생산하는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 뉴로스포라 크라사(Neurospora crassa)의 자일로스 환원효소를 캔디다 트로피칼리스(Candida tropicalis)에서 고활성으로 발현시키기 위하여 유전자 부호 최적화(codon optimization)을 수행하여 획득한 최적화된 자일로스 환원효소; 최적화된 유전자를 발현시키기 위해, 클로닝된 캔디다 트로피칼리스(Candida tropicalis)의 글리세알데히드-3-인산 탈수소효소(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)의 프로모터와 터미네이터 부분; 및 선별마커인 URA3가 포함된 발현벡터, 상기 발현벡터를 자일리톨 탈수소효소(xylitol dehydrogenase)가 불활화된 캔디다 트로피칼리스에 도입하여 제조된 자일로스 환원효소가 항구적으로 발현되는 자일리톨 생산균주, 및 상기 균주를 유가식 배양을 통해 탄소원인 포도당의 억제를 받지 않고 자일리톨을 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 자일로스 환원효소의 항구적 고발현을 통한 자일리톨 생산방법은 포도당을 보조기질로 사용하여 고수율, 고생산성으로 자일리톨을 생산하는데 유용하게 사용될 수 있다.