본 발명은 N-카바모일라아제 변이효소를 암호화하는 유전자, 전기 유전자로부터 발현되는 N-카바모일라아제 변이효소, 전기 유전자를 포함하는 재조합 플라스미드, 전기 재조합 플라스미드로 형질전환된 미생물, 전기 미생물을 배양하여, N-카바모일라아제 변이효소를 생산하는 방법, 전기 N-카바모일라아제 변이효소를 이용하여 비천연 D-아미노산을 제조하는 방법 및 전기 N-카바모일라아제 변이효소의 활성여부를 분석하는 활성 착색방법에 관한 것이다. 본 발명의 N-카바모일라아제 변이효소는 야생형의 효소보다 산화적 안정성이 증대되었기 때문에, 이를 이용하여 DTT를 첨가할 필요없이 보다 효율적이고 경제적으로 비천연 D-아미노산을 제조할 수 있다. N-카바모일라아제, 산화적 안정성, 활성 착색방법, D-아미노산