Ｂｃｌ２ 단백질을 과발현하고 ＬＤＨ－Ａ에 대한 짧은 헤어핀 ＲＮＡ를 발현하는 ＤＨＦＲ이 결핍된 신규한 ＣＨＯ 세포주, 그의 제조 방법 및 상기 형질전환된 ＣＨＯ 숙주세포를 이용한 목적 단백질의 생산 방법A transformed cell line transfected by a vector which over-expresses Bcl2 protein and a vector which produces shRNA against LDH-A, and a method of producing target proteins using the above transformed cell line
본 발명은 항예정사 유전자인 B 세포 림프종 2(B-cell lymphoma 2, Bcl2)를 과발현하고 젖산 생성을 촉매하는 A형 젖산 탈수소효소(lactate dehydrogenase A, LDH-A) 유전자를 저발현 하도록 형질전환되고 다이하이드로폴레이트 환원효소(dihydrofolate reductase, Dhfr) 유전자가 결핍된 신규한 CHO 세포주, 그의 제조 방법 및 상기 형질전환된 CHO 세포주를 이용한 목적 단백질의 생산 방법에 관한 것으로서, 상기 형질전환된 CHO 세포주는 항예정사 단백질인 Bcl2의 과발현으로 인하여 예정사가 억제되어 세포의 생존 능력이 증가하고, 젖산 생성 효소인 LDH-A의 저발현으로 인하여 배양 시 배지에 축적되는 노폐물 중 하나인 젖산의 생성이 억제되어 젖산의 축적을 줄여주며, 세포의 생존과 세포 대사에 관련된 유전자를 조작함으로써 두 개의 형질이 동시에 전환됨으로써, 이러한 형질전환은 세포의 생존율을 높이는 동시에 세포 대사의 흐름이 목적 단백질의 생산성을 높여줄 뿐만 아니라 외부환경에 대한 스트레스를 줄여 생산된 목적 단백질의 질을 향상시킬 수 있으므로 원하는 목적 단백질의 제조에 유용하게 이용될 수 있다.
- Assignee
- 한국과학기술원
- Country
- KO (South Korea)
- Issue Date
- 2013-05-30
- Application Date
- 2010-12-21
- Application Number
- 10-2010-0131477
- Registration Date
- 2013-05-30
- Registration Number
- 10-1271713-0000
- Appears in Collection
- BS-Patent(특허)
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